真空冷冻干燥技术简称冻干技术,是生物、制药、化学、材料等领域用来提取纯化和保存样品的常见应用方法之一,本文将列举一些常见样品的共晶点温度及其冻干方式,与大家共同探讨。
*,在冻干过程中关键的条件就是控制样品温度保持在共晶点温度以下10-15℃,从而保证样品不熔化,维持微孔结构和理化性质保持完好不变。现将一些常见样品的共晶点温度数据和冻干方式整理出来,供大家参考。
表一 常见样品的共晶点温度:
物质 | 共晶点温度℃ | 物质 | 共晶点温度℃ |
藻类 | -15~-25 | 书籍考古文物 | 0~3 |
细菌、病毒、真菌、疫苗 | -40或更低 | 植物、鱼类 | -15 |
胶原 | -35 | 组织样品 | -56 |
食品:水果、蔬菜、肉类 | -25 | 蜂王浆、蜂蜜 | -40 |
陶瓷粉 | -10 | 污泥 | -25 |
蛋白质、酶、血液制品 | -13~-40 | 奶粉 | -13(牛奶) |
核酸和多肽 | -30 | 有机溶剂制品 | 低于-50 |
蔬菜材料 | -10(某些-30) | 聚合物材料如医疗用材料 | -2~-30 |
尿样、粪便等需做残留分析 | -30 | 以水为主含有少量有机溶剂或盐类 | -2~-30 |
表二罗列的是一些常见样品冻干方式的推荐方式,包括预冻温度、冻干时系统应该维持的真空度值、冻干的方式Process A还是Process B、冻干容器的选择、冻干机的功能要求等。
表二 常见样品冻干方式推荐:
样品 | 预冻温度℃ | 共晶点温度℃ | 真空度mbar | 主冻干时间h |
细菌、病毒、真菌、疫苗 | -40或更低 | -30~-35(或更低) | 0.12或更低 | 24-48 |
冻干方式A/B | 冻干容器 | 冻干机功能 | 冻干过程设计 | |
A/B | 安瓿瓶、样品盘等 | 如可控制真空度、搁板可控温等 | -40℃/5h,每5个h提升5℃(3~4次),然后间隔时间减至每3h,每1.5h。 | |
样品 | 预冻温度℃ | 共晶点温度℃ | 真空度mbar | 主冻干时间h |
蛋白质、酶、血液制品 | 建议旋动机旋冻 | -13~-40 | 0.77~0.07 | 1cm厚度24 |
冻干方式A/B | 冻干容器 | 冻干机功能 | 冻干过程设计 | |
A/B | 5-500ml的容器如圆底烧瓶、冻干瓶,样品盘 | 如可控制真空度、搁板可控温等 | -30℃/5h,每5h升温5℃(3次),减至每2h间隔 | |
样品 | 预冻温度℃ | 共晶点温度℃ | 真空度mbar | 主冻干时间h |
核酸和多肽 |
| -30 | 0.12 | 24~36 |
冻干方式A/B | 冻干容器 | 冻干机功能 | 冻干过程设计 | |
A/B | 核酸:微量管 多肽:样品盘、冻干瓶、安瓿瓶等 | 如可控制真空度、搁板可控温等 | -30℃/5h,每5小时升温5℃(5~6次),减至每2h间隔 | |
样品 | 预冻温度℃ | 共晶点温度℃ | 真空度mbar | 主冻干时间h |
有机溶剂制品 | 低于-50 | 不确定 | 依据共晶点温度 | 不确定 |
冻干方式A/B | 冻干容器 | 冻干机功能 | 冻干过程设计 | |
A | 依据样品而定 | 防腐蚀设计、真空度可控、搁板温度可控等 | 防止局部融化温度依据共晶点审慎设计 | |
样品 | 预冻温度℃ | 共晶点温度℃ | 真空度mbar | 主冻干时间h |
植物 | -10℃(特殊物种-40℃)超低温冰箱或者LN2 | -15(特殊物种-30) | 1.03~0.12 | 36 |
冻干方式A/B | 冻干容器 | 冻干机功能 | 冻干过程设计 | |
A/B | 样品盘 | 真空度可控等 | -10~-15℃/5h,每5h升温5℃(5-6次),减至每2h间隔 |
备注:Process A:预冻、干燥均在冷阱内进行;Process B:预冻在其它仪器内进行,如超低温冰箱、冷水浴等,干燥在冻干机中进行,如在丙烯酸玻璃材质的干燥腔内。
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